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电泳槽密封条漏液的原因与处理（垂直槽）

一般情况下，电泳槽较窄的密封条不易漏夜，反之较宽的则比较容易漏，发现电泳槽漏液时要检查：

1、密封条是否老化或损坏，若已经老化或损坏，应更换密封条。

2、如果密封条完好无损，目测检查密封条是否有凹凸不平现象，如果有应将密封条拆下进行重新安装。安装时注意不要拉扯密封条，使其自然地嵌入密封槽内，并保证安装均匀，电泳槽价格，避免密封条出现凹凸现象。

3、如果缓冲液是从密封条的中间漏出，则说明漏处比两边凹（不在同一水平线上），电泳槽多少钱，我们则需要把密封条拆下，电泳槽批发，清理干净槽内胶粘剂，然后再将薄厚相当的窄边条（如0.4毫米）粘在槽内，以垫起凹下的密封条，使其与两边保持一致，此后再将密封条粘在槽内即可。

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蛋白电泳中经常出现的问题和解决方法

1：“微笑”(两边翘起中间凹下)形带，主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所

致，多出现于较厚的凝胶中。 处理办法：待其充分凝固再作后续实验。

2： “皱眉”(两边向下中间鼓起)形带

主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。

处理办法：在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。

3：出现拖尾现象?

主要是样品融解效果不佳、样品降解或分离胶浓度过大引起的。

处理办法：加样前离心;选择适当的样品缓冲液；电泳缓冲液时间过长，重新配制

4：电泳的条带很粗?

电泳中条带很粗是常见的事，主要是未浓缩的原因。

处理办法：适当增加浓缩胶的长度; 保证浓缩 胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压

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琼脂糖水平电泳槽实验操作

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1. 根据电泳需要，配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。一般为 1× TAE或0.5×TBE。

注意：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。

2. 根据制胶量及凝胶浓度，在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中，加入准确称量的琼脂糖粉。

注意：总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。

3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖

注意：必须保证琼脂糖充分完全溶解，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。

注意：EB是一种致***物质。使用含有EB的溶液时，请戴用手套。EB在可见光下会分解。

5.将琼脂糖溶液倒入制胶托盘中，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在5－8 mm 之间。

注意：不要产生气泡，溶液温度太高(gt;60℃)，电泳槽，会使得水分

过分蒸发，改变凝胶离子浓度，影响电泳效果。

6.在室温下使胶凝固（大约30 分钟），然后放置于电泳槽中进行电泳。

注意：凝胶不立即使用时，用保鲜膜将凝胶包好在4℃下保存，或者放在制胶的缓冲液中，一般可保存2～5 天。