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SDS-PAGE电泳

蛋白质在SDS-PAGE电泳中，迁移率只和其分子量相关

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PAGE据其有无浓缩效应，分为连续系统与不连续系统，连续系统电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同，带电颗粒在电场作用下，主要靠电荷及分子筛效应；不连续系统电泳体系中由于缓冲液离子成分、pH、凝胶浓度及电位梯度的不连续性，带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应、分子筛效应，还具有浓缩效应，故分离效果更好。不连续的凝胶作为支持介质，利用凝胶层的不连续性、缓冲液离子的不连续性、PH的不连续性及电位梯度的不连续性，使样品在不连续的两相间积聚浓缩成很薄的起始区带，然后进行分离。

核酸电泳的原理

核酸电泳的原理

1.核酸分子中糖-磷酸骨架中的磷酸基团，呈负离子化状态；核酸分子在一定的电场强度的电场中，他们会向正电极方向迁移；

2.电泳中使用无反应活性的稳定的支持介质，电泳迁移率（或迁移速度）与分子大小、介质粘度等成反比；

因此，可在同一凝胶中、一定电场强度下分离出不用分子量大小或相同分子量但结构型有差异的核酸分子。

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核酸电泳技术介绍

核酸电泳技术介绍

凝胶电泳分离核酸的基本原理凝胶电泳是分子生物学中鉴定、量化和纯化核酸的常用实验技术。 因其速度、简便性和通用性，该方法广泛应用于核酸的分离和分析。 采用凝胶电泳法，可在几分钟到数小时内分离出约0.1 - 25 kbp范围内的核酸，且可高纯、***地从凝胶中回收分离的核酸。

该项技术主要，在大小、电荷和结构的基础上，将电场施加于带电分子混合物上并引起迁移。 中性至碱性pH值(图1A)范围内，核酸中核苷酸骨架上的磷酸基团带负电。 因此，每个核苷酸携带一个净负电荷，即，一个核酸分子的总电荷与核苷酸的总数或它的质量成正比。 换言之，DNA或RNA分子的荷质比是恒定的。 因此，它们在凝胶电泳中的迁移率主要取决于其大小（结构可比较时）（详细了解 核酸结构如何影响迁移）。 因此，当受到电场作用时，核酸从负极（阴极）向正极（阳极）迁移，较短的碎片比较长的碎片移动得更快，导致基于尺寸的分离。

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