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发布时间:2020-04-20 04:51:40
电泳槽内不导电
电泳槽内无电流(铂金电极上无气泡)
1、首先利用万用表检查电泳电源有无输出电压(注意选择直流电压挡,输出不得超过量程,以免损坏万用表)。
2、利用万用表电阻挡检查电泳槽导线是否导通。
3、利用万用表电阻挡检查电泳槽电极头与铂金丝之间是否导通,***检查电极头是否与连接铂金丝的焊片紧密连接,如发现松动请使用尖嘴钳将其紧固即可,完毕后再进行检测,若还没有电流通过则检查铂金丝是否断裂,若铂金丝有断裂迹象则需要和生产厂家的***服务部门联系,由厂家负责处理,一般需要对铂金丝进行更换处理。
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核酸电泳技术介绍
核酸电泳技术介绍
凝胶电泳分离核酸的基本原理凝胶电泳是分子生物学中鉴定、量化和纯化核酸的常用实验技术。 因其速度、简便性和通用性,该方法广泛应用于核酸的分离和分析。 采用凝胶电泳法,可在几分钟到数小时内分离出约0.1 - 25 kbp范围内的核酸,且可高纯、***地从凝胶中回收分离的核酸。
该项技术主要,在大小、电荷和结构的基础上,将电场施加于带电分子混合物上并引起迁移。 中性至碱性pH值(图1A)范围内,核酸中核苷酸骨架上的磷酸基团带负电。 因此,每个核苷酸携带一个净负电荷,即,一个核酸分子的总电荷与核苷酸的总数或它的质量成正比。 换言之,DNA或RNA分子的荷质比是恒定的。 因此,它们在凝胶电泳中的迁移率主要取决于其大小(结构可比较时)(详细了解 核酸结构如何影响迁移)。 因此,当受到电场作用时,核酸从负极(阴极)向正极(阳极)迁移,较短的碎片比较长的碎片移动得更快,导致基于尺寸的分离。
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蛋白质电泳槽WesternBlot垂直电泳制胶器漏胶问题分析
蛋白质电泳槽 Western Blot 垂直电泳制胶器漏胶问题分析
Western Blot转膜之前免不了要在蛋白质垂直电泳槽中跑胶分离蛋白质。关于制胶,大多数用户还是喜欢用电泳槽配套的制胶器来自己制胶跑电泳,经济实惠。但是很多实验室因为设备已经使用多年,常会发现垂直电泳槽的制胶器没有原来好用了,经常会有“漏胶”或者“漏液”的现象,也就是说,凝胶溶液还没有来得及凝固,就从玻璃板某个周围的某个缝隙“漏”出去了。
较糟糕的情况莫过于,漏液速度没那么快,刚加好溶液时看不出来有漏胶或者漏液,而等了半小时凝胶凝固之后才发现,玻璃板之间的凝胶已经偷偷地漏了一节下去,导致需要重新制胶。
用市面比较常见的制胶模具设计举例,在下图中可以看到,玻璃板中间盛装凝胶溶液,玻璃板两侧靠夹子夹紧玻璃板和边条压片,下方用一个较厚的橡胶垫做密封,这样就组成了一个单侧上开口的三明治夹形状。
如果密封的好,凝胶溶液就会凝固成与边条压片厚度一致的凝胶用来做后续的蛋白质电泳。
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