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发布时间:2020-05-23 03:24:52
琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物。将琼脂糖在所需缓冲液中加热熔化成清澈、透明的溶胶,然后倒入胶模中,凝固后将形成一种固体基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。
将凝胶置电场中,小型转印电泳槽生产厂家,在中性pH值下带电荷的核酸通过凝胶网孔向阳极迁移,迁移速率受到核酸的分子大小、构象、琼脂糖浓度、所加电压、电场、电泳缓冲液、嵌入染料的量等因素影响。在不同条件下电泳适当时间后,小型转印电泳槽,大小、构象不同的核酸片段将处在凝胶不同位置上,从而达到分离的目的。琼脂糖凝胶的分离范围较广,用各种浓度的琼脂糖凝胶可分离长度为200bp至50kb的DNA。
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电泳概述
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电泳涂装是以水溶性或水分散性的涂料为主要原料,被涂物浸在涂料中作为阴极或阳极,小型转印电泳槽厂商,再加入导电性对应电极,通以直流电而在工件表面形成涂料层。一般根据涂料性质分阴极电泳和阳极电泳。其成膜过程分四步:
1)、电解
2)、电泳
3)、电沉积
4)、电渗
蛋白电泳中经常出现的问题和解决方法
1:“微笑”(两边翘起中间凹下)形带,主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所
致,多出现于较厚的凝胶中。 处理办法:待其充分凝固再作后续实验。
2: “皱眉”(两边向下中间鼓起)形带
主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法:在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。
3:出现拖尾现象?
主要是样品融解效果不佳、样品降解或分离胶浓度过大引起的。
处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液;电泳缓冲液时间过长,重新配制
4:电泳的条带很粗?
电泳中条带很粗是常见的事,主要是未浓缩的原因。
处理办法:适当增加浓缩胶的长度; 保证浓缩 胶贮液的pH正确(6.7);适当降低电压
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