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发布时间:2020-06-03 08:11:55
DNA电泳
DNA电泳常见问题分析及解决方案
DNA条带模糊:1,DNA降解避免核酸酶污染;2,电泳缓冲液陈旧电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液;3,所用电泳条件不合适电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃;巨大DNA链电泳,温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力;4, DNA上样量过多减少凝胶中DNA上样量;5,DNA样含盐过高电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐;6,有蛋白污染电泳前酚抽提去除蛋白;7,DNA变性电泳前勿加热,用20mM N***缓冲液稀释DNA
不规则DNA条带迁移:1, 对于λ/Hind III片段cos位点复性电泳前于65℃加热DNA 5分钟,然后在冰上冷却5分钟;2,电泳条件不合适电泳电压不超过20V/cm;温度<30℃;经常更换电泳缓冲液;3,DNA变性以20mM N*** Buffer稀释DNA,电泳前勿加热
带弱或无DNA条带:1,DNA的上样量不够增加DNA的上样量;聚酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高,上样量可适当降低;2, DNA降解避免DNA的核酸酶污染;3,DNA走出凝胶缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;4,对于EB染色的DNA,所用光源不合适应用短波长(254nm)的紫外光源
DNA带缺失:1,小DNA带走出凝胶缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度;2,分子大小相近的DNA带不易分辨增加电泳时间,核准正确的凝胶浓度;3, DNA 变性电泳前请勿高温加热DNA链,以20mM N*** Buffer稀释DNA;4,DNA链巨大,常规凝胶电泳不合适 在脉冲凝胶电泳上分析
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核酸电泳制胶
北京龙方电泳为您提供信息如下, 龙方电泳 伴您成功!
制胶:可以根据具体需要制作小胶、宽胶、长胶或方胶。
现分别介绍四种不同规格凝胶的制作方法。
1、小胶(6cm×6cm):每个制胶器可以灌制两块小胶,将选好的两个小凝胶托盘平行放入制胶器内,然后把您已经选好齿数(中间带缺口)的加样梳插入到制胶器的***槽中,倒入加热过的琼脂糖胶液(注意:凝胶液体温度控制在60℃左右,加样孔靠近负极一端)。
2、宽胶(12cm×6cm):每个制胶器可以灌制一块宽胶,将选好的凝胶托盘平行放入制胶器内,然后将您选好齿数的加样梳插入到制胶器的***槽中,倒入加热过的琼脂糖胶液(注意:凝胶液体温度控制在60℃左右,加样孔靠近负极一端)。
3、长胶(6cm×12cm):每个制胶器可以灌制一块长胶,将选好的凝胶托盘平行放入制胶器内,然后将您选好齿数的加样梳插入到制胶器的***槽中,倒入加热过的琼脂糖胶液(注意:凝胶液体温度控制在60℃左右,加样孔靠近负极一端)。
3、方胶(12cm×12cm):每个制胶架可以灌制一块方胶,将选好的凝胶托盘平行放入制胶器内,然后将您选好齿数的加样梳插入到制胶器的***槽中,倒入加热过的琼脂糖胶液(注意:凝胶液体温度控制在60℃左右,加样孔靠近负极一端)。
核酸电泳槽
1、凝胶尺寸(W×L):6cm×6cm;12cm×6cm;6cm×12cm;12cm×12cm。
2、加样梳规格:25齿 11齿;13齿 6齿;18齿 8齿; 2齿 3齿。
3、加样梳厚度:1.0mm、1.5mm,、2mm。
4、主体采用较好的PC材料注塑成型,外形美观。
5、电极采用带有耐电解腐蚀、耐高温、纯度≥99.95%的铂金制做,具有良好的导电性能,并且便于清洗和更换。
6、正常工作条件为:环境温度(0~40)℃;相对湿度≤80%;周围无强烈振动;实验台应保持水平。
7、电泳槽可连续工作时间长达24h。
8、开盖断电,保证安全。
9、允许使用外接的电泳电源较大电压为 200V,电流200mA。
10、外型尺寸(L×W×H)31cm×15cm×9cm。
缓冲液总容积650ml。11、重量:1100g
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