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蛋白电泳制胶

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制胶

将玻璃板洗净晾干，将厚板粘有边条的一侧与薄板重叠（薄板向外），放入制胶框内（如果放置困难可选择先放厚板再放薄板要求2块玻璃板底面对齐），将制胶夹胶框的卡锁转向外侧，将玻璃板固定。

用手捏紧制胶架上的固定夹，将整个制胶框置于制胶架上，小型蛋白电泳槽，松开固定夹，令卡块压住厚玻璃板，使玻璃板底面贴紧制胶架底部的密封垫。

向凝胶腔内缓慢注入配制好的聚丙烯酰胺凝胶(如灌制梯度凝胶需使用梯度混合器)，先灌注分离胶，待分离胶凝固后，再灌浓缩胶。 浓缩胶灌满后，插入样品梳，待30至45分钟凝胶完全聚合后，小型蛋白电泳槽公司，制胶完成。

核酸电泳染色液

核酸电泳常用染色液

1、***化乙锭（ethidium bromide，小型蛋白电泳槽批发， EB）

较为常用的核酸荧光染料，可嵌入核酸双链的配对碱基之间，在紫外线激发下，发出桔红色荧光。 EB-DNA复合物中的EB发出的荧光，比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍，因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。若EB背景太深，可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCI2中5min，使非结合的EB褪色，这 样可检查到10ng的DNA样品，EB也可用于检测单链DNA或RNA，但其对单链核酸的亲和力相对较小，荧光产率也相对较低。

2、***橙（acridine orange， AO）：

***橙可嵌入双链核酸碱基对之间，在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光；还通过静电与单链核酸的磷酸基结合，在254nm紫外线激发 下产生640nm的红色荧光。因此可区分单链和双链核酸，灵敏度分别为0.1μg和0.05μg。但***橙的染色操作要求严格，应在 22℃，0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.0）中避光浸泡30min，然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。

3、亚甲蓝（methylene blue）

可将RNA染成蓝色，小型蛋白电泳槽供应商，但灵敏度不高，而且操作时间长。染色过程：胶浸泡于0.02%的亚甲蓝，10mmol/L Tris-Ac（pH8.3），4℃放置1~2h，用净水洗5~8h（反复换水），带型肉眼可见，较低检测量为 250ng。

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电泳概述

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电泳涂装是以水溶性或水分散性的涂料为主要原料，被涂物浸在涂料中作为阴极或阳极，再加入导电性对应电极，通以直流电而在工件表面形成涂料层。一般根据涂料性质分阴极电泳和阳极电泳。其成膜过程分四步：

1)、电解

2)、电泳

3)、电沉积

4)、电渗

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